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LC梯度色譜儀分析中色譜峰展寬的柱外因素

更新時間:2017-04-24點擊次數:2366
   LC梯度色譜儀分析中色譜峰展寬的柱外因素
  LC梯度色譜儀分析中色譜峰展寬的柱外因素有進樣器、檢測器和連接管中的死體積。采用細內徑的管路,盡量減小連接管路的長度,采用死體積小的檢測器,采用合適的進樣方式和技術,可降低柱外效應。
  一、采用細內徑的管路,盡量減小連接管路的長度。
  若管路內徑減小,其長度可增加。若管路內徑增大,其長度要縮短。內徑0.25mm連接管應為100mm左右或更短。內徑0.5mm連接管,長度應在10mm以下。
  連接管內徑減小,管內壓力降較大,泵壓會上升。
  二、采用死體積小的檢測器。
  一般檢測池內色譜峰展寬小于總的色譜峰展寬的10%時,要求檢測池體積小于14μL,一般為5~8μL。
  三、LC梯度色譜儀采用合適的進樣方式和技術。
  進樣有時是色譜峰展寬的主要原因,這取決于進樣體積和進樣方式。
  進樣體積越大,柱外效應越大。
  進樣方式一般有閥進樣與注射器進樣兩種。閥進樣允許進樣體積大,注射進樣允許進樣體積小。進樣體積還與溶質k值有關,溶質k值越大,允許進樣的體積越大。
  LC梯度色譜儀不分流進樣時,在氣化室中氣化的含有大量溶劑的樣品不可能瞬間進入毛細管柱,溶劑峰會嚴重拖尾,使早流出組分的色譜峰被掩蓋在溶劑拖尾峰中,從而使分析變得困難甚至不可能。這種由于進樣時間延長引起的色譜峰展寬稱為時間性譜帶展寬。時間性譜帶展寬可采用溶劑效應和熱濃縮來抑制。
  所謂溶劑效應是指進祥時柱溫比溶劑沸點低15~30℃,當不分流進樣完畢后,打開分流閥,用載氣吹掃氣化室中殘留的溶質和溶劑,同時柱溫開始升高,溶劑開始蒸發(fā),溶質以窄的起始譜帶開始進行分離的過程。
  LC梯度色譜儀所謂熱濃縮是指進樣時柱溫比溶質沸點低很多,使溶質冷凝在柱頭上,同時柱溫比溶劑沸點高很多,使溶劑保留為氣態(tài)的過程。在此條件下不會出現溶劑效應。如果柱溫比溶質沸點低150℃以上,熱濃縮會有效地把溶質濃縮到很窄的區(qū)帶上。
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